冷凍過程中緩沖鹽結(jié)晶導(dǎo)致pH變化

，濃度為100 mM時(shí)，最終凍結(jié)后pH值為2.8，濃度為10 mM時(shí)，最終凍結(jié)后pH值為4.1（左圖最右側(cè)兩個(gè)柱子）。

（3）與其他溶質(zhì)的相互作用：制劑處方中的其他溶質(zhì)和緩沖液組分的相互作用可能會影響彼此的結(jié)晶傾向。了解共溶質(zhì)對緩沖液結(jié)晶的影響是很重要的，因?yàn)檫@將影響冷凍濃縮液的pH，從而影響蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。
例如，當(dāng)含有磷酸鹽緩沖液(10或100 mM)和甘氨酸(0.8% w/v)的溶液被冷凍時(shí)，這兩種組分都更易結(jié)晶。雖然這并不影響甘氨酸作為凍干賦形劑的功能，但緩沖鹽的明顯結(jié)晶導(dǎo)致凍結(jié)時(shí)pH值發(fā)生變化。

有趣的是，0.8% w/v濃度甘氨酸的存在增加了10mM和100mM磷酸鹽緩沖液在冷凍時(shí)的pH值變化幅度。而在低濃度(0.4% w/v)下，甘氨酸反而會抑制磷酸鹽緩沖液在冷凍時(shí)的pH值變化。然而，在如此低的濃度下，甘氨酸可能無法發(fā)揮凍干賦形劑的作用。因此，需要明智地選擇配方成分及其濃度，以確保各個(gè)組分的功能，從而獲得穩(wěn)定的凍干制劑處方。

同樣，磷酸鹽緩沖液也能抑制甘露醇結(jié)晶。下圖展示了緩沖液濃度對甘露醇和甘氨酸在最終冷凍產(chǎn)品中結(jié)晶情況的影響，溶液中甘露醇和甘氨酸含量為5% w/w。當(dāng)甘露醇和甘氨酸混合使用時(shí)，磷酸鹽緩沖鹽在冷凍溶液中顯著抑制這兩種溶質(zhì)的結(jié)晶，磷酸鹽緩沖液濃度的增加（50mM~200mM）降低了甘露醇和甘氨酸的結(jié)晶度。