。常見(jiàn)的硼酸鹽緩沖溶液有硼砂緩沖液、硼酸-硼砂緩沖液
。
硼砂緩沖溶液的配制是將一定質(zhì)量的硼砂溶于蒸餾水中,再用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至合適值,pH值范圍一般為8.0~9.0;也可用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值,pH值范圍一般為8.0~10.8。而硼酸-硼砂緩沖溶液則一般由一定量的硼酸和硼砂溶于蒸餾水中配制而成,pH值范圍一般為6.5~8.9左右。當(dāng)應(yīng)用于生化溶液時(shí),需要加入一定量的NaCl以維持溶液等滲。
因硼酸-硼砂緩沖液的pH值范圍與淚液接近,所以在一些眼藥水的制備中常作為pH值調(diào)節(jié)劑或滲透壓調(diào)節(jié)劑,如普拉洛芬滴眼液的配制。而硼砂緩沖液則可作為一些藥物的釋放介質(zhì),如其對(duì)合(氯)霉素有助溶作用。
3 三羥甲基氨基甲烷—鹽酸緩沖溶液(Tris- HCl)
三羥甲基氨基甲烷簡(jiǎn)稱(chēng)Tris,分子式為C4H11NO3,結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1。分子中的氨基(—NH2)為堿性,因此Tris是一種弱堿,常與鹽酸構(gòu)成緩沖溶液,簡(jiǎn)稱(chēng)Tris-HCl緩沖液。該緩沖液一般由一定質(zhì)量的Tris溶于蒸餾水中,再用HCl調(diào)節(jié)至適合的pH值。在配制時(shí)還需加入NaCl以維持溶液等滲。
因Tris-HCl緩沖液的pH值受溶液濃度 、溫度影響較大,以及易與空氣中的二氧化碳反應(yīng)
,所以在使用時(shí)需現(xiàn)用現(xiàn)配制
。

Tris-HCl緩沖液的緩沖原理為:Tris中的-NH2與HCl結(jié)合生成Tris·HCl鹽。季銨基團(tuán)Tris·H+與Tris形成緩沖對(duì) ,溶液中存在Tris·H++H2O←→Tris+H3O+平衡關(guān)系
,憑借該平衡移動(dòng)來(lái)發(fā)揮緩沖作用。其緩沖范圍一般為7.0~9.0
。
由于Tris對(duì)生化過(guò)程干擾很小 ,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀
,所以在DNA
、蛋白質(zhì)等生物大分子實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常應(yīng)用,Tris-HCl緩沖溶液可以做DNA
、蛋白質(zhì)的溶解液或提取液
,也是DNA相關(guān)研究實(shí)驗(yàn)中的重要緩沖液,如DNA的捕獲與釋放
、染色體的特異性標(biāo)記等方面
。
具體應(yīng)用方面,目前已上市的新冠mRNA疫苗其中一款(mRNA-1273®,Moderna,2020)選用Tris作為緩沖體系。已上市抗體藥物中也有Tris的應(yīng)用,如quan球shou個(gè)全人源的腫瘤壞死因子拮抗劑注射用依那西普(Enbrel,恩利)。
4 羥yi基paiqin乙磺酸(供注射用)(HEPES)
4-羥yi基paiqin乙磺酸(簡(jiǎn)稱(chēng)HEPES),分子式為C8H18N2O4S。分子結(jié)構(gòu)中既含有酸性的磺酸基(-SO3H),又含有兩個(gè)堿性叔胺氮,所以呈現(xiàn)兩性,可用來(lái)配制兩性離子緩沖液。該緩沖溶液一般由一定量的HEPES溶于蒸餾水中,再用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至適當(dāng)值。其pH緩沖范圍一般為6.8~8.2。緩沖溶液的濃度以及外界溫度對(duì)其pH值影響不大,因此能夠較長(zhǎng)時(shí)間維持穩(wěn)定的pH值。因HEPES分子中的-SO3H呈現(xiàn)較強(qiáng)的酸性,易給出H+;兩個(gè)叔胺氮各含有一個(gè)孤對(duì)電子,呈現(xiàn)堿性,可以接受H+生成季銨鹽。所以磺酸基和叔胺在水溶液中互為緩沖對(duì)。而且,單個(gè)HEPES分子中的叔胺和磺酸基也可傳遞H+生成內(nèi)鹽,即兩性離子。在水溶液中,HEPES分子、內(nèi)鹽以及磺酸基和叔胺各自產(chǎn)生的離子之間因H+或OH-的轉(zhuǎn)移而能夠相互轉(zhuǎn)化建立平衡關(guān)系
,憑借該平衡關(guān)系的移動(dòng)來(lái)抵御外來(lái)酸堿的影響來(lái)調(diào)節(jié)溶液pH值穩(wěn)定
,所以具有緩沖作用,其平衡轉(zhuǎn)化關(guān)系見(jiàn)下圖
。

HEPES 緩沖溶液具有對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性、不易穿過(guò)生物膜、不參與細(xì)胞內(nèi)生化過(guò)程等特點(diǎn)
,所以在生化實(shí)驗(yàn)中具有廣泛的應(yīng)用
,如可用于開(kāi)放式細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞的長(zhǎng)期觀察
、RNA 或 DNA 提取試劑盒中
。其次,相關(guān)研究表明以 HEPES 溶液做緩沖液有利于多肽在金納米粒子表面的偶聯(lián)反應(yīng)
。另外,HEPES 緩沖溶液對(duì)鎂生物降解影響的相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明
,HEPES 能提高鎂的生物降解性以及抑制鎂不溶鹽層的形成
。
具體應(yīng)用方面,如鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液(Onivyde)。2022年4月15日,施維雅公司(SERVIER)宣布,其胰腺癌治療藥物易安達(dá)(通用名:鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液)獲得中國(guó)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局(NMPA)正式批準(zhǔn),與5-氟尿嘧啶(5-FU)和亞葉酸(LV)聯(lián)合用于治療接受吉西他濱治療后進(jìn)展的轉(zhuǎn)移性胰腺癌患者。伊立替康脂質(zhì)體注射液作為一款轉(zhuǎn)移性胰腺癌治療藥物,早前已在全球多個(gè)國(guó)家和地區(qū)獲批。更多信息詳見(jiàn)《易安達(dá)(鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液)正式獲批!制劑處方,發(fā)展歷程及市場(chǎng)前景深度分析》
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