好消息一：
C12-200有效遞送siRNA[1]，通過組合篩選，可實(shí)現(xiàn)低劑量，高效率的基因沉默效果。
好消息二：
AVT的C12-200已上線，歡迎詢價(jià)采購。
在發(fā)現(xiàn)和開發(fā)能夠引導(dǎo)小干擾RNA(SiRNA)通過許多屏障保護(hù)目標(biāo)細(xì)胞內(nèi)部的載體方面，人們做出了巨大的努力。雖然研究已經(jīng)顯示基因沉默在體內(nèi)的潛力，但要發(fā)揮RNA干擾療法的zui廣泛潛力，必須提高給藥效果。通過組合，合成和篩選不同類別的材料，已經(jīng)確定了一種能使siRNA引導(dǎo)的小鼠肝臟基因沉默的配方，其劑量低于0.01毫克/千克。這種制劑在一次注射后還能同時(shí)抑制五個(gè)肝基因的表達(dá)。這種制劑的潛力在非人類靈長類動物中得到進(jìn)一步驗(yàn)證，在這種情況下，在低至0.03mg/kg的劑量下，觀察到臨床相關(guān)基因轉(zhuǎn)胸腺肽的高度敲除水平。據(jù)文章所示，這種制劑有助于基因沉默，其劑量比任何先前描述的siRNA肝傳遞系統(tǒng)所要求的低一個(gè)數(shù)量級。
Lipidoid-siRNA制劑的體內(nèi)篩選是由類脂，膽固醇，和PEG脂質(zhì)組成。在100、20和100 mg/mL的無水乙醇中分別溶解得到了類脂、膽固醇和DMG-mPEG 2000的原液。各組分按照比例組合 用Jeffs等人提出的方法制備了C12-200-siRNA。用90%乙醇(摩爾比50：10：38.5：1.5)對C12-200、DSPC、膽固醇和mPEG 2000-DMG進(jìn)行增溶。siRNA在10 mm檸檬酸鹽溶液中溶解（pH3.0，緩沖液濃度為0.4mg/mL）。用裝有雙相泵頭的蠕動泵，在等效體積流量下，混合在“T"結(jié)中，對乙醇脂質(zhì)溶液和siRNA水溶液進(jìn)行了泵提。脂質(zhì)與siRNA的結(jié)合比例為7：1(wt:wt)。用PBS(155 mm NaCl，3mm Na2HPO4，1mm KH2PO4，pH7.5)對自發(fā)形成的C12-200-siRNA進(jìn)行透析，去除乙醇和交換緩沖液。 圖1：通過組合，設(shè)計(jì)了陽離子脂質(zhì)化合物庫。 基于脂質(zhì)的載體介導(dǎo)的siRNA體外釋放。 以熒光素酶表達(dá)的Hela衍生細(xì)胞株為研究對象，以高通量的方式篩選脂質(zhì)類材料。對這些細(xì)胞進(jìn)行基因修飾，穩(wěn)定表達(dá)酶。在本實(shí)驗(yàn)中 圖2：脂質(zhì)體庫的體外篩選 在表達(dá)熒光素酶的Hela細(xì)胞中，對脂質(zhì)體進(jìn)行篩選。（A）將抗熒光素酶的siRNA與可電離陽離子脂質(zhì)復(fù)合，與培養(yǎng)基中的細(xì)胞共同孵育。（B）小劑量siRNA沉默熒光素酶。 圖3：在小鼠體內(nèi)沉默FVII因子。 圖4：通過檢測FVII蛋白水平，觀察C12-200介導(dǎo)的基因沉默在體內(nèi)持續(xù)時(shí)間超過40天。 圖5：五個(gè)位于肝臟的基因靶點(diǎn) 據(jù)我們所知 圖6:C12-200-siRNA顆粒通過大細(xì)胞吞噬引起細(xì)胞攝取 （A） 用C12-200配制的熒光標(biāo)記的siRNA與HeLa細(xì)胞在各種內(nèi)吞途徑的標(biāo)記標(biāo)記物存在下孵育 圖7:C12-200對非人類靈長類動物的治療效果 食蟹猴（每組n=3）通過頭靜脈接受PBS或0.03 本研究最終認(rèn)為：開發(fā)安全有效的siRNA遞送載體是基于RNAi的治療方法持續(xù)進(jìn)步的重要組成部分 Reference： [1]. Lipid-like materials for low-dose, in vivo gene silencing 艾偉拓（上海）醫(yī)藥科技有限公司 地址：上海市浦東新區(qū)張楊路838號27樓A座 © 2025 版權(quán)所有：艾偉拓（上海）醫(yī)藥科技有限公司 備案號：滬ICP備19003552號-3 總訪問量：291821 站點(diǎn)地圖 技術(shù)支持：制藥網(wǎng) 管理登陸
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