LNP穩(wěn)定性
除了mRNA 的完整性外，LNP 的穩(wěn)定性對(duì)于 mRNA-LNP 疫苗的質(zhì)量也至關(guān)重要。目前的mRNA疫苗沒(méi)有披露關(guān)于LNP 穩(wěn)定性測(cè)試的數(shù)據(jù)，但 Onpattro (patisaran) 的siRNA-LNP 制劑保存在2~8°C 之間時(shí)具有三年的有效期，同時(shí)該產(chǎn)品不能冷凍保存。
Onpattro 的LNP 系統(tǒng)的組成是：可電離的陽(yáng)離子脂質(zhì)DLin-MC3-DMA、DSPC、膽固醇、PEG2000-C-DMG（見(jiàn)表 1）（摩爾比 50:10:38.5:1.5），它們?cè)诮M成上類似于 Comirnaty 和 mRNA-1273的LNP。在一項(xiàng)siRNA-LNPs 的研究中用類脂質(zhì)306O 13代替DLin-MC3-DMA，樣品水溶液在 2°C 、pH 7 的環(huán)境下下能穩(wěn)定儲(chǔ)存156 天，其粒徑和siRNA包封率沒(méi)有明顯變化。Suzuki 等人的補(bǔ)充研究表明 siRNA-LNP 能在 4°C 環(huán)境下穩(wěn)定儲(chǔ)存1.5。總之，這些數(shù)據(jù)都表明是mRNA 的不穩(wěn)定，而不是 LNP 的不穩(wěn)定，導(dǎo)致了當(dāng)前mRNA-LNP疫苗的儲(chǔ)存條件嚴(yán)苛和保質(zhì)期短。
Fan等人總結(jié)了脂質(zhì)體和 LNP的穩(wěn)定性及其質(zhì)量屬性。LNP 可以承受化學(xué)和物理不穩(wěn)定性，化學(xué)不穩(wěn)定性包括 LNP 中易水解和氧化的脂質(zhì)的降解。脂質(zhì)氧化可能發(fā)生在不飽和脂肪酸部分（Comirnaty 和 mRNA-1273 不存在該問(wèn)題）和膽固醇，氧化可能是PEG2000 -DMG中PEG基團(tuán)存在雜質(zhì)導(dǎo)致的結(jié)果。除此之外，氧化性雜質(zhì)也可能導(dǎo)致包封的mRNA 氧化 LNP 穩(wěn)定性的另一個(gè)關(guān)鍵因素是物理穩(wěn)定性，主要有三種類型的物理不穩(wěn)定性：包封的藥物的聚集 另一種類型的物理不穩(wěn)定性主要由于mRNA 的泄漏 圖6 用于 mRNA-LNP疫苗BNT162b2 (Comirnaty) 和 mRNA-1273的脂質(zhì)。 由于注射 mRNA-LNP疫苗時(shí)的超敏反應(yīng)可能與PEG化脂質(zhì)有關(guān)，因此，已經(jīng)研究了防止聚集體形成的替代脂質(zhì)。使用多聚肌氨酸修飾脂質(zhì)能使脂質(zhì)遞送系統(tǒng)更加穩(wěn)定，在防止LNP聚集的同時(shí)能夠減少超敏反應(yīng)。但是目前仍然需要更多的實(shí)驗(yàn)來(lái)確定這種 PEG化脂質(zhì)替代品是否能真正的提高 mRNA 的穩(wěn)定性（例如不含過(guò)氧化物，注：目前使用的PEG脂質(zhì)由于工藝原因，會(huì)有一定的過(guò)氧化物雜質(zhì)，這會(huì)引起LNP中其他含有不飽和鍵的脂質(zhì)和mRNA的氧化降解）。 分析 LNP 穩(wěn)定性 Fan 等人在前面提到的文章中對(duì)監(jiān)測(cè) LNP 穩(wěn)定性的分析方法進(jìn)行了專業(yè)評(píng)估。我們推薦感興趣的讀者可以查看相關(guān)文獻(xiàn)。 mRNA-LNP中哪個(gè)成分更不穩(wěn)定？ 迄今為止，已有幾項(xiàng)研究考察了在儲(chǔ)存期間穩(wěn)定 mRNA 和穩(wěn)定 LNP 的方法。然而，兩者之中哪一個(gè)才是mRNA-LNP穩(wěn)定性的瓶頸？當(dāng)mRNA-LNP 制劑未冷凍時(shí)，是mRNA 降解？還是 LNP 降解導(dǎo)致穩(wěn)定性問(wèn)題？還是 mRNA 與 LNP 的組合？ 與mRNA-LNP 系統(tǒng)相比，包封化學(xué)修飾且高度穩(wěn)定的siRNA 分子（例如 Onpattro）的LNP系統(tǒng)具有更長(zhǎng)的有效期。這表明當(dāng)前的穩(wěn)定性瓶頸不是 LNP，而是 mRNA 迄今為止 在Pascolo等人的綜述中 Roesler等人2009年的研究表明 Wayment-Steele等人經(jīng)過(guò)基于理論降解速率計(jì)算 圖7 通過(guò)轉(zhuǎn)染BHK-21細(xì)胞中熒光素酶表達(dá)效率分析mRNA在水中的穩(wěn)定性 這些研究表明，在水溶液中 mRNA 可能不如 LNP 穩(wěn)定。然而，應(yīng)該重申的是，這兩種成分的穩(wěn)定性考察結(jié)果可能與LNP包封mRNA 的情況不同 儲(chǔ)存條件不同的原因 當(dāng)前 mRNA 疫苗的另一個(gè)有趣方面是 Acuitas Therapeutics的執(zhí)行官Tom Madden 曾經(jīng)在采訪中表示 此外 艾偉拓（上海）醫(yī)藥科技有限公司 地址：上海市浦東新區(qū)張楊路838號(hào)27樓A座 © 2025 版權(quán)所有：艾偉拓（上海）醫(yī)藥科技有限公司 備案號(hào)：滬ICP備19003552號(hào)-3 總訪問(wèn)量：291821 站點(diǎn)地圖 技術(shù)支持：制藥網(wǎng) 管理登陸
